近日，动物科技学院羊遗传改良与生物育种团队在基于糖基化酶的碱基编辑器安全性评估及绵羊生物育种应用研究方面取得重要进展，研究成果以“Efficient glycosylase-mediated base editing with minimal off-target effects in mammalian embryos”为题在线发表《Genome Biology》，学院魏迎辉教授、研究生曹锡、黄舒泓、刘祖江、岳阳、本科生罗沐华为论文共同第一作者，王小龙教授、徐坤副教授、魏迎辉教授和新疆畜牧科学院畜牧研究所吴伟伟研究员为论文的共同通讯作者。

研究利用GOTI (Genome-wide Off-target analysis by Two-cell embryo Injection) 技术及RNA-seq技术对基于N-甲基嘌呤DNA糖基化酶MPG的AYBE-V106W和gGBE两种基因编辑工具进行了全基因组DNA水平和全转录组RNA水平的脱靶效应检测，结果发现AYBE-V106W和gGBE在DNA水平并没有表现出可以检测到的脱靶效应，而AYBE-V106W在RNA水平表现出较低的脱靶事件发生（图1）。随后，利用AYBE-V106W和gGBE两种工具在绵羊胎儿成纤维细胞和绵羊胚胎中进行了基因编辑效果测试，基于筛选到的靶标绵羊MSTN基因的高效sgRNA序列，制备出AYBE-V106W介导的6只基因编辑绵羊和gGBE介导的3只基因编辑绵羊（图2）。最后，通过对基因编辑绵羊进行基因型检测和脱靶效应评估，结果表明AYBE-V106W和gGBE实现了高效的A > C和G > C的偏好编辑，同时并未检测到明显的脱靶事件发生（图2）。

图1 利用GOTI技术评估AYBE和gGBE在DNA和RNA水平上的脱靶效应

图2 AYBE和gGBE在绵羊胎儿成纤维细胞和绵羊胚胎上实现了安全高效碱基编辑

该研究基于高灵敏度、全基因组范围的GOTI脱靶检测技术和RNA-seq技术对AYBE和gGBE进行了系统性的评估，证实了其较高的编辑安全性，并率先实现基因编辑绵羊的制备，展示了其在动物生物育种领域内的广阔应用前景，也暗示着研究人员需进一步优化A/G到T碱基编辑的效率和特异性，从而实现两种工具在基因治疗或农业育种应用中的精准高效编辑。

该研究得到新疆重大科技专项（2024A02004-1和2023A02011-2）、农业生物育种重大专项（2023ZD04051和2022ZD04014）、国家自然科学基金（32441080和32301251）和西北农林科技大学人才项目等项目资助。

文章链接：https://genomebiology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13059-025-03838-6